Az áramlási citometria sok éven át ismert diagnosztikai és kutatási technika, amelyet széles körben alkalmaznak az onkológiában. Az áramlási citometria lehetővé teszi a lamináris vagy rétegzett folyadékáramban szuszpenziót alkotó sejtek áramlási citométer nevű eszközzel történő vizsgálatát. Melyek az áramlási citometria indikációi és hogyan történik?
Az áramlási citometriát a hematológiai neoplazmák diagnosztizálásában alkalmazzák, mivel ezek folyékony daganatok, de ez csak kiegészítő módszer. Érdemes azonban emlékezni arra, hogy van egy rák, amelyet csak ezzel a módszerrel lehet diagnosztizálni. Ez krónikus limfocita leukémia.
Más daganatos betegségek esetén az áramlási citometriát használják diagnosztikai segítségként, mivel a neoplasztikus sejtek nagyon fontos jellemzőit mutatja. Ezt a módszert használják az alkalmazott kezelés hatékonyságának felmérésére is.
Áramlási citometria - mit mutat?
A vizsgálati részecskéket tartalmazó folyadékáramot állandó sebességgel (100-2000 részecske / másodperc) vezetjük át a citométer mérési területén. Az optikai módszerek itt elemzik a sejtek alakját, méreteit, belső szerkezetét és tartalmát, pl. DNS-t. Minden sejt optikailag jelölt.
A mérések a lézerfény egyes sejtek vagy komponensei (magok, kromoszómák, mitokondriumok) által szórt tulajdonságain vagy az általuk kiváltott fluoreszcencián alapulnak.
Az optikai jeleket elektromos jelekké alakítják, amelyeket elemzésük után grafikusan mono- vagy biparametrikus eloszlásként mutatnak be.
A citométer lehetővé teszi a részecske szegregációt a mérési zónából való kilépés után is. Elmondható, hogy a készülék ugyanazokkal az alkotóelemekkel rendezi (szegregálja) a sejteket (preparatív rendezés), vagy bizonyos típusú sejteket kivon (analitikus fajta).
Az áramlási citometria lehetővé teszi a sejtek populációjellemzőinek, a sejtkomponensek (különösen, mint például a nukleinsavak, fehérjék, felszíni és sejtantigének) elemzését, az enzimatikus aktivitást, a membránpotenciált, a mitokondriális aktivitást, az intracelluláris pH-t, az iontranszportot és a membrán fluiditását.
Áramlási citometria - alkalmazás
A diagnosztikában alkalmazott áramlási citometria lehetővé teszi a neoplasztikus sejtek fenotípusának és az egyes fehérjék expressziójának meghatározását. Ennek elérése érdekében jelölt fluoreszcens antitesteket használunk, amelyek jellegzetes módon kötődnek a sejtmembrán felszínén található antigénekhez. Ennek köszönhetően meg lehet határozni differenciáltságuk mértékét, eredetüket, prognosztikai és terápiás markereiket, amelyek megkönnyítik a további diagnosztikai és terápiás eljárások döntését.
Az áramlási citometriának egy másik alkalmazása az alkalmazott kezelés hatékonyságának figyelemmel kísérése az ún "maradványbetegség", amely a kezelés után megmaradt daganatszerű fenotípusú sejtek aránya.
Az áramlási citometria megkönnyíti a rák kutatását is. Ennek a módszernek köszönhetően lehetőség van keresni például azokat a receptorokat, amelyek a neoplasztikus sejtek felszínén vannak, és a kezelés célpontjává válhatnak.
A módszer lehetővé teszi a sejtekben lévő fehérjék aktivitásának értékelését. Lehetséges a sejtciklus értékelése is, például a sejtben lévő DNS mennyiségének meghatározásával.
A szaporodás során egy sejt olyan fázisokon keresztül halad át a sejtcikluson, amelyekben megduplázódik a DNS mennyisége. Ennek az összegnek a felmérésével meg lehet jelölni, hogy a sejtek milyen fázisban vannak, szaporodnak-e vagy sem, vagy apoptózisba kerülnek-e. Más szavakkal, az áramlási citometria segítségével megtudhatja, hogy a sejtek készülnek-e az apoptózisra, a programozott halálozási folyamatra.
Áramlási citometria - a jövő
Az áramlási citometriát több évtizede ismerik és használják az orvostudományban. Azonban folyamatosan fejlesztik, és új diagnosztikai és kutatási lehetőségeket teremt. A módszer alkalmazásának első periódusában csak a sejtek méretét és szemcsésségének mértékét lehetett meghatározni.
A lézerfény használata az áramlási citometriás eszközökben lehetővé teszi bizonyos fluoreszcens markerek gerjesztését, majd azok emissziójának értékelését. A modern citométerek lehetővé teszik az egyszerre kiértékelt markerek számának jelentős növekedését, ami mindenképpen ennek a módszernek az érzékenységének növekedését jelenti.
Ezért alkalmazzák nemcsak a daganatos betegségek diagnosztizálásában, hanem a kezelés hatékonyságának felmérésére is.
A szerzőről
Olvassa el a cikk további cikkeit
