Kariotípus: citogenetikai vizsgálat és eredményei

A kariotípus az összes olyan kromoszóma összessége, amely minden szomatikus sejt magjában megtalálható, az egyes fajokra jellemző számmal és felépítéssel. A kariotípus-teszt egy olyan citogenetikai teszt, amely lehetővé teszi a kromoszómák számában (kromoszóma-numerikus aberrációk) és struktúrájában (kromoszóma-strukturális aberrációk) tapasztalható rendellenességek kimutatását.

A kariotípus tartalmazza a kromoszómák teljes készletét, amely egy személyre jellemző. A kromoszómák DNS-ből és fehérjékből álló struktúrák, az emberi test minden magozott sejtjében 46 kromoszóma található, köztük 22 autoszómapár és 1 pár heteroszóma, azaz nemet meghatározó kromoszóma.

A kariotípus-teszt egy citogenetikai teszt, amely lehetővé teszi a kromoszómák számában (kromoszóma-numerikus aberrációk) és struktúrájában (kromoszóma-strukturális aberrációk) tapasztalható rendellenességek kimutatását.

A kariotípus ismerete különösen fontos azok számára, akik hosszú ideig és sikertelenül próbálnak gyereket vállalni (ebben az esetben mindkét partnernek meg kell tennie őket), nőknek, akik sokszor tapasztalták a vetélést, vagy akiknek született egy halott gyermekük, valamint genetikai betegségekben szenvedőknek. kromoszóma-rendellenességek okozzák a fenotípusos jellemzők alapján felállított diagnózis megerősítésére.

Tartalomjegyzék:

1. Normál kariotípus
2. Kariotípus: a vizsgálat célja
3. Javallatok a kariotípus meghatározásához és teszteléséhez
4. Kariotípus: a tanulmány anyaga
5. Hogyan szűrjük a kariotípust?
6. A kariotípus eredmények bemutatása
7. Kariotípus: a teszt ideje és ára

Normál kariotípus

A normális emberi kariotípus 46 kromoszómából áll, amelyek közül 23 az anyától öröklődik (ekkora a női ivarsejt sejtmagja - a petesejt) és 23 az apától (a hím ivarsejt sejtmagjában található - sperma).

A kromoszómakészlet között 22 autoszómapár található (amelyek felelősek az összes tulajdonság örökléséért és továbbadásáért, kivéve a nemhez kapcsolódóakat) és 1 pár heteroszómák (felelősek a nemi vonatkozások öröklődéséért).

A kariotípust olyan számok írják le, amelyek a szomatikus sejtekben a kromoszómák teljes számát képviselik, valamint az X és Y nagybetűket, amelyek a nemi kromoszómákat képviselik.

A normális női kariotípus leírása 46, XX (tehát 46 kromoszómából áll, amelyek közül 2 X kromoszóma nemet meghatározó kromoszóma), a normális férfi kariotípus pedig 46, XY (hasonlóan 46 kromoszómából áll, és a nem két heteroszóma (X és Y) határozza meg.

Kariotípus: a citogenetikai teszt célja

Citogenetikai vizsgálatot és kariotipizálást végeznek annak ellenőrzésére, hogy a beteg kromoszómáinak száma és szerkezete megfelelő-e. A kromoszómák számának rendellenességeit kromoszóma-rendellenességeknek nevezzük, amelyek közül a következőket különböztetjük meg:

• numerikus kromoszóma-rendellenességek

A normál morfológiájú kromoszómák számának rendellenességei általában a kóros sejtosztódásból származnak. Kiemelkedik:

• Poliploid (euploid) sejtek, amelyekre jellemző a reproduktív sejtekre jellemző haploid kromoszómakészlet (1n = 23 kromoszóma) sokszorosa, pl. Triploid sejtek (3n = 69 kromoszóma; 69. kariotípus, XXY), tetraploid (4n = 92 kromoszóma; 92. kariotípus) , XXXY). Az ilyen rendellenességek nem gyakoriak, és az embereknél általában halálosak
  
  
• Aneuploid sejtek, melyeket a megfelelő szerkezetű egyes kromoszómák megnövekedett vagy csökkent száma jellemez. Az ilyen rendellenességek egyaránt befolyásolhatják az autoszómákat és a nemet meghatározó kromoszómákat. A kóros kromoszómák abnormális száma által okozott betegség-szindrómák példái a következők:
  - monoszómia - Turner-szindróma 45, X0 (hiányzik egy nemi kromoszóma)
  - trisomia - Down-szindróma 47, XX, +21 vagy 47, XY, +21 (extra 21. kromoszóma párban)

• Strukturális kromoszóma-rendellenességek

Ezek a kromoszómák szerkezetének zavarai, amelyek száma egy szomatikus sejtben helyes. A leggyakoribbak a következők:

• törlés (a kromoszóma karjának töredékének elvesztése)
• duplikáció (a kromoszóma karjának egy bizonyos részének megkettőzése)
• beillesztés (egy másik kromoszóma további fragmensének beillesztése a kromoszóma rövid vagy hosszú karjába)
• inverzió (a kromoszóma karjának egy részét 180 fokkal elfordítva)
• transzlokáció (a kromoszóma karjának egy részének áthelyezése egy másik kromoszómába)
• gyűrűs kromoszómák (ezek akkor jönnek létre, amikor egy vagy több kromoszóma megtörik és újra kapcsolódik)

Javallatok a kariotípus meghatározásához és teszteléséhez

Citogenetikai teszteket és kariotipizálást végeznek felnőtteknél, teherbe esni próbáló pároknál, terhes nőknél és gyermekeknél. Sok jelzés van az ilyen diagnosztikára, különösen:

• Reprodukciós kudarc

- a pár meddősége (úgy definiálják, hogy a rendszeres nemi közösülés ellenére hetente 3-4 alkalommal, legalább egy éven át nem terhes, bármilyen fogamzásgátlás nélkül)
- visszatérő vetélések és a terhesség fenntartásának nehézségei
- halva született
- a kromoszómák számában vagy felépítésében fellépő rendellenességek előfordulásával összefüggésben genetikailag meghatározott betegségben szenvedő gyermek születése
- a kariotípus vizsgálata olyan partnerekben, akik in vitro megtermékenyítésen szeretnének átesni

• A genetikai prenatális diagnózist balesetben jelzik

- az anya magas kora (35 év feletti nők) a terhesség idején
- a kromoszómák számának vagy szerkezetének rendellenességei a gyermek vagy testvérek szüleiben
- a magzati képalkotás nem invazív technikáján alapuló prenatális vizsgálatok kóros eredményei ultrahang alkalmazásával, amelyek a magzat kromoszóma-rendellenességeinek fokozott kockázatát jelezhetik (fokozott nyaki transzlucencia, az orrcsontok fejlődésének rendellenességei)

• A kromoszóma-rendellenességek által okozott betegségek diagnosztikája

- a páciens fenotípusos tulajdonságokkal rendelkezik, amelyek egy adott kromoszóma-szindróma vagy diszmorf tünetek jelenlétére utalnak a diagnózis megerősítésére
- kromoszóma-rendellenességek által okozott betegségek jelenléte a közvetlen családban

• Nemi differenciálódási rendellenességek

- a külső nemi szervek rendellenes szerkezete, ami lehetetlenné teszi az újszülött nemének egyértelmű meghatározását
- nincsenek szexuális érés jelei

Kariotípus: a tanulmány anyaga

A vizsgálati anyag általában:

• Perifériás vénás limfociták
  
  
• Amniociták vagy a magzat hámló sejtjei, amelyek terhes nő magzatvízében találhatók. Vizsgálatuk lehetővé teszi a magzat kariotípusának meghatározását. A magzatvíz gyűjtését (amniocentézis, amniocentesis) speciális központokban egy speciálisan képzett nőgyógyász végzi ultrahangos készülékek irányítása alatt. Ez abból áll, hogy az anya hasfalán keresztül szúró tűt helyeznek a magzatvízbe, és 15-20 ml magzatvizet gyűjtenek. Ez egy invazív teszt, amely számos szövődményt tartalmaz, beleértve a terhesség elvesztésének kockázatát, a nemi szervekből való foltosodást, a magzatvíz szivárgását, valamint az intrauterin fertőzést, az intrauterin halált vagy a tűszúrást. A terhesség 15. és 20. hete között végezhetők el.
  
  
• A chorionus villus mintavétele során összegyűjtött sejtek
  
  
• A korionos villus mintavételét a terhesség 9. és 12. hete között végzik. Ez egy invazív teszt, sok komplikációval, hasonlóan az amniocentézis teszthez.
  
  
• A kodrocentézis során összegyűlt magzati vérsejtek
  
  
• Kordocentézis, azaz a köldökzsinór defektálása tűszúró tűvel, szigorú ultrahang-ellenőrzés mellett. A terhesség 16. hetét követően végzik, hogy magzati vért gyűjtsenek vizsgálatra. Ez egy invazív teszt, amelyet ritkán végeznek, és számos komplikáció lehetőségével jár együtt, hasonlóan az amniocentézis és a chorionus villus mintavételéhez.
• Szövetkultúrával nyert fibroblasztok
  
  
• A rákos daganatokból származó sejtek

Hogyan szűrjük a kariotípust?

A kromoszómák teljes készletének tesztelése elvégezhető a test bármely sejtmaggal rendelkező sejtjének tesztelésével, de a leggyakoribb alkalmazás a perifériás vér limfocitái.

A páciens vénás perifériás vérének kis mennyiségéből mintát kell gyűjteni az alapszintű vérvizsgálathoz, például a teljes vérképhez. A páciens előzetes felkészítése a vizsgálatra nem szükséges, a nap bármely szakában elvégezhető, és a betegnek nem kell böjtölnie.

A citogenetikai vizsgálat elvégzéséhez vérmintából szükséges a sejtosztódás (mitózis) - metafázis megfelelő szakaszában gátolt limfociták megszerzése. Erre a célra a sejteket in vitro tenyésztjük. Ha sejtosztódás-stimulátorokat alkalmaznak, akkor szaporodásra ösztönzik őket.

Amikor a sejtek eljutnak a mitotikus metafázis szakaszába, egy speciális anyagot adnak be a szaporodási folyamat gátlására a kiválasztott mitotikus fázisban. A metafázis szakaszában a kromoszómák a legjobban fejlõdtek, és a legegyszerûbb módszer azok részletes elemzésére. A kariotípus-teszt következő lépése a kromoszómák festése annak érdekében, hogy az egyes kromoszómák jellegzetes csíkképét megkapjuk.

Ennek alapján az elemző képes felismerni a megfelelő kromoszómákat és homológ párokra osztani őket. A kromoszómák számának és szerkezetének elemzése speciális berendezések, pontos fénymikroszkóp és számítógépes szoftverek segítségével lehetséges.

A kariotípus eredmények bemutatása

A kapott és festett kromoszómákat fel kell ismerni és fel kell osztani a megfelelő homológ kromoszómapárokra, amelyeket 1 és 22 közötti számmal jelölünk. Azonosításuk az egyes kromoszómákra jellemző sávok elrendezésének köszönhetően lehetséges. A heteroszómákat vagy nemi kromoszómákat X és Y betűkkel jelöljük.

22 kromoszómapár és 1 autoszómapar grafikus eloszlását karogramnak nevezzük. Ennek elvégzéséhez szükséges a mikotikus metafázis stádiumában leállított, speciálisan festett kromoszómák fotomikrográfiája. A kapott kromoszómákat kivágjuk a fényképekből, és homológ párokban rendezzük el méretük, centromér elhelyezkedésük és csíkmintájuk szerint.

Kariotípus: a teszt ideje és ára

Általában 2–4 hétbe telik a citogenetikai teszt elvégzése és a kariotípus kifejlesztése, mert a tesztsejtek in vitro tenyészetének létrehozásához és a sejtosztódás leállításához szükséges a megfelelő szakasz.

A páciens kariotípusa magántulajdonban meghatározható a citogenetikai laboratóriumban, és az Országos Egészségpénztár megtérítheti.

A magán körülmények között végzett vizsgálat költsége 500 PLN körül ingadozik, és kissé eltérhet attól a laboratóriumtól függően, amelyben azt elvégzik.